在生物學研究與豬相關(guān)疾病的檢測中，豬免疫球蛋白 G（IgG）的定量檢測至關(guān)重要。豬免疫球蛋白 G（IgG）試劑盒（ELISA）為此提供了精準的檢測方案。
實驗原理
試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。在預包被抗豬 IgG 抗體（固相抗體）的微孔酶標板中加入校準品和待測樣本，再加入 HRP 標記的抗豬 IgG 抗體（酶標抗體）。溫育和充分洗滌后，形成固相抗體 - 抗原 - 酶標抗體的夾心復合物。加入底物 A 和 B，在 HRP 催化下產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，經(jīng)終止液（2M 硫酸）作用轉(zhuǎn)化為黃色。通過酶標儀在 450nm 波長測定吸光度（OD 值），其與待測樣品中豬 IgG 濃度正相關(guān)，進而擬合校準品曲線，計算樣本中豬 IgG 濃度。
試劑盒限制性
- 僅供科研使用，嚴禁用于臨床診斷。
- 必須在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不可使用。
- 不能與其他廠家的試劑盒或者組分混用。
- 需使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
- 若樣本值高于最高標準品濃度值，應將樣本適當稀釋后重新測定。
- 待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果，檢測前需排除該因素。
- 通過其他方法得到的檢測結(jié)果，與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接可比性。
技術(shù)提示
1、混合蛋白溶液時，避免起泡。
2、加校準品與樣本時，每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應該懸臂加樣，避免交叉污染。
3、合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟，是保證實驗結(jié)果準確性的必要條件。
4、使用自動洗板機時，加入一個 30 秒浸泡的步驟，可以提高檢測精度。
5、底物溶液為無色液體，保存過程中變?yōu)樗{色，代表底物溶液已經(jīng)失效，不得使用。
6、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致，加入終止液后，藍色底物產(chǎn)物，會瞬間變?yōu)辄S色。
7、實驗中，用剩的板條，應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
8、所有液體組分，使用前充分搖勻，嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行溫育操作。